형광 현미경은 고강도 광원을 사용하여 시료를 조명하고 시료의 형광 색소를 여기시키는 일종의 광학 현미경입니다. 표본의 조명은 일반적으로 자외선을 방출하는 광원을 사용하여 수행됩니다. 그들은 생물학, 의료 및 산업 분야에서 널리 사용됩니다.
형광현미경은 어떻게 작동하나요?
형광 현미경은 수은이나 크세논 램프를 사용하여 자외선을 생성합니다. 빛은 현미경으로 들어와 이색성 거울, 즉 한 파장 범위는 반사하고 다른 범위는 통과시키는 거울에 부딪칩니다. 이색성 거울은 자외선을 표본까지 반사합니다. 일부 표본에는 엽록소와 같은 형광 물질이 포함되어 있기 때문에 자외선 아래에서 자연적으로 형광을 발합니다. 관찰할 표본이 자연적으로 형광을 발하지 않는 경우 형광색소라고 불리는 형광 염료로 염색할 수 있습니다.
형광현미경은 무엇으로 구성되어 있나요?
1. 광원
가장 일반적인 광원은 수은, 크세논, LED입니다. 수은은 형광 현미경에 최고의 품질의 빛을 제공합니다. LED는 다른 소스보다 가격이 저렴하고 전력 소비도 적기 때문에 점점 더 대중화되고 있습니다.
| 수은 램프 | 크세논 램프 | 주도의 | |
| 방출된 빛의 파장 | 350-370nm | 400nm~ 450nm | 400-700nm |
| 수명(시간) | 200-300 | 400-600 | 10000 |
| 이점 | 1. 가장 일반적인 광원인 고강도 빛. 2. 강한 자외선과 청자색을 방출하여 모든 종류의 형광단을 자극합니다. 3. 밝고 다채로운 이미지. | 1. 스펙트럼 강도가 안정적입니다. 2. 적외선 및 중적외선의 스펙트럼 강도가 강합니다. | 1. 교체가 용이하다. 2. 예열할 필요가 없습니다. 3. 즉시 켜고 끌 수 있습니다. 4. 광원 강도를 제어합니다. |
| 불리 | 1. 짧은 수명. 2. 예열 시간이 길다. | 1. 과도한 열에 대비하여 특수 저전압 DC 전원 상자가 필요합니다. 2. 수은 램프보다 비싸다 | 1. 자외선은 수은등보다 약합니다. 2. 빛의 각 파장은 방출하는 대역폭이 좁기 때문에 별도의 LED가 필요합니다. |
수은 형광등 부착물
LED 형광등 부착
2. 여기 필터
여기 필터는 형광 현미경의 작동에 필수적입니다. 형광 염료가 흡수할 수 있는 더 짧은 파장의 빛을 통과시킵니다. 또한, 이는 흥미로운 빛의 다른 광원을 차단합니다.
여기 필터(B,G,U,V)
3. 이색성 거울
이색성 거울은 특정 파장의 빛을 반사하고 다른 파장의 빛을 투과시키는 일종의 광학 필터입니다. 이는 여기 파장과 방출 파장을 분리하기 위해 형광 현미경에 사용됩니다.
4. 배출 필터
방출 필터는 형광단에서 방출되는 파장만 통과시키고 이 대역 외부의 모든 원치 않는 빛, 특히 여기 파장을 차단합니다.
5. 형광염료
형광염료는 형광성이 강한 유기화합물로, 고조도의 자외선에 의해 여기되어 명암 대비가 높은 가시광선 녹색광을 방출하여 형광 이미지를 형성할 수 있습니다. 일반적으로 사용되는 형광 염료는 다음과 같습니다. DAPI(49,6-diamidino-2-phenylindole), 아크리딘 오렌지, 아우라민-로다민, Alexa Fluors 또는 DyLight 488.
형광현미경은 몇 종류인가요?
1. 정립형 표면형광 현미경:
가장 일반적인 유형의 형광 현미경입니다. 형광단의 여기와 형광 검출은 동일한 광 경로(즉, 대물렌즈를 통해)를 통해 수행됩니다. 대부분의 형광 현미경, 특히 생명 과학에 사용되는 형광 현미경은 표면 형광 디자인입니다.
BS-2081F 연구용 형광생물현미경
2. 공초점형광현미경:
공초점 형광 현미경: 이 유형의 형광 현미경은 레이저 스캐닝과 형광 조명을 결합하여 이미지를 생성합니다. 세포와 조직을 연구하고, 세포 내 단백질과 기타 물질을 검출하고, 물질의 두께를 측정하는 등 광범위한 응용 분야에 사용할 수 있습니다.
BS-2081F 연구용 형광생물현미경
3. 도립형광현미경
이런 종류의 현미경의 광원과 콘덴서는 위쪽에 아래쪽을 향하고 있습니다. 조명 각도는 검사 대상 시편 표면에 대해 90도여야 합니다.
BS-2095F 도립형광현미경
형광현미경의 장점과 단점은 무엇입니까?
장점:
- 살아있는 유기체의 세포를 손상시키지 않고 관찰 가능
- 정확한 색상으로 고해상도 이미지 제공
- 세포의 살아있는 과정을 연구할 수 있습니다.
- 단백질이나 핵산과 같은 세포 내부의 다양한 유형의 분자를 식별하는 데 사용됩니다.
단점:
-형광염료가 부착된 세포 내부의 특정 구조만을 관찰할 수 있습니다.
-형광 과정 중 전자 여기로 인한 광퇴색은 형광 염료의 반응성 분자에 영향을 줄 수 있습니다. 결과적으로 반응성 염료는 형광 방출 강도의 화학적 특성을 잃을 수 있습니다.
-형광단 분자가 단파장 빛에서 고에너지 광자를 흡수하기 때문에 세포는 형광 염료로 염색된 후 광독성 효과에 취약합니다.
형광현미경의 용도는 무엇입니까?
형광현미경은 생화학, 세포생물학, 미생물학, 면역학, 의학 등 다양한 연구 및 응용 분야에서 널리 사용됩니다.
1. 생물학 분야에서 형광현미경은 형광 염료 라벨링을 통해 세포 및 초미세 세포 구성 요소와 활동을 정확하고 자세하게 식별할 수 있습니다.
2. 의료 분야에서 형광 현미경은 형광 시약을 사용하여 박테리아 및 바이러스의 존재 및 분포를 감지하거나 수술 대상을 라벨링하여 수술을 용이하게 하는 데 도움을 줄 수 있습니다.
3. 광물학 분야에서 형광현미경은 아스팔트, 석유, 석탄, 산화 그래핀 및 기타 광물과 같이 자연발광 특성을 가진 물질을 연구하는 데 자주 사용됩니다.
4. 재료 과학에서 형광 현미경은 섬유 산업이나 제지 산업에서 섬유 기반 재료를 분석하는 데 사용될 수 있습니다.
게시 시간: 2023년 3월 14일